本发明提供一种3,5?二苯并咪唑基?8?对氰基苯基氟硼荧类衍生物，属于氟硼荧衍生物技术领域。所述氟硼荧类衍生物具有下述式Ⅰ所示结构：本发明还提供氟硼荧类衍生物的制备方法。本发明所用合成路线为C–H/N–H直接氧化偶联反应，与传统的氟硼荧氨化制备技术相比较，缩短了有机合成步骤，避免了底物预活化的繁琐过程，提高了反应的兼容性，增加了合成反应总产率。将本发明氟硼荧类衍生物应用于细胞内质网专一性荧光显影和荧光标记中，成本远低于市售的细胞内质网标记试剂，可以解决现有技术中内质网靶向试剂结构复杂，合成不方便，价格昂贵的问题。