本发明属于法医学检测试剂盒领域，具体涉及一种基于20个单倍群D的Y‑SNP遗传标记的法医学复合检测试剂盒。针对现有的检测试剂盒只能准确的将样本归属到Y染色体上，无法更准确的将其归属至单倍群D细枝的问题，本发明提供了一种复合检测试剂盒，包括：分离包装的复合扩增引物混合物、多重单碱基延伸反应引物混合物和标准DNA2800M。本发明的试剂盒应用复合扩增以及单碱基延伸技术，可一次性获得生物检材的20个Y染色体单倍群D的SNP遗传标记的基因分型，并将属于单倍群D的中国男性样本准确划分至高分辨率Y染色体系统进化树单倍群D的细枝上，快速进行族源推断。