本发明属于基因工程和禽病疫苗制备技术领域，公开了一种有效免疫IB与ND的唾液乳酸杆菌的制备方法，包括如下步骤：分别扩增SpUsp45‑Tuftsin、EpiC、F‑DCpep和AcmA基因，连接SpUsp45‑Tuftsin和EpiC基因，连接F‑DCpep和AcmA基因，再连接四个基因，得到重组基因，将重组基因转入pMG36e载体，再将pMG36e载体转入TCMM17感受态，得到有效免疫IB与ND的唾液乳酸杆菌。本发明的优点在于，该制备方法简单易操作，便于规模化生产和应用，生产的唾液乳酸杆菌对IBV的攻毒保护率达到80％，对NDV的攻毒保护率达到90％，可在鸡群内可长期定植，为鸡群提供持续的免疫保护，具有广阔的应用前景和良好的社会经济效益。