本发明公开了一种立构复合晶聚乳酸纳米纤维、抑菌性立构复合晶聚乳酸纳米纤维及其制备方法与应用。本发明采用PDLA‑g‑CS和左旋聚乳酸通过静电纺丝制备得到，PDLA‑g‑CS具有分散性强的右旋聚乳酸支化分子侧链，使所得聚乳酸纳米纤维可在小于80℃温度下短时间内形成立构复合晶，显著降低聚乳酸纳米纤维加工温度及缩短加工时间，从而使该立构复合聚乳酸纳米纤维能够作为载药纳米纤维，特别是对于易在80℃以上失活的抑菌活性成分，能够确保所载药物的稳定性及药物活性。本发明提供的抑菌性立构复合晶聚乳酸纳米纤维是一种绿色无污染的环境友好型除菌材料，可广泛用于制备水处理材料、食品包装材料、防护材料和植入材料等。