本发明提供了一种FnCpf1或其突变体介导的体外DNA编辑试剂盒。本发明将crRNA的转录，酶切连接反应结合在同一反应混合物中，一步实现载体和目的片段的组装。而且获得了具有更广PAM识别范围的FnCpf1突变体，可以识别PAM为60/64(PAM‑NNN)选择可以用于该编辑方案的包括YN,TAA,TAC,TGC,CAA，将FnCpf1的识别范围扩大4倍。由于Cpf1的优势，本发明方法只需要有一种消化酶可以取代目前的各种类型的限制性内切酶并且几乎没有序列依赖性，同时酶切和连接反应一步进行。提供了一个广泛DNA靶向范围的CRISPR体外编辑系统,并可以作为一个有效的一步反应的无缝编辑工具。