本发明提供了一种用于检测Pb2+浓度的试剂盒及检测方法，该试剂盒包括以下组分：菁染料、Pb2+标准溶液、DNA双链、酸性缓冲溶液和中性缓冲溶液。检测方法包括：分别绘制中性、酸性条件下Pb2+检测标准曲线；将待测样品、DNA双链和菁染料混合，将混合溶液在20‑40℃孵育15‑25min，然后测定其在448nm处的吸光度或在616nm处的荧光强度，根据检测出的吸光度或荧光强度来判断待测样品的酸度情况，然后结合中性或酸性条件下Pb2+检测标准曲线计算出Pb2+浓度。该试剂盒体系简单，检测方法灵敏度高，检出限低，准确性高，同时还能反映出待测样品的酸度情况，进而为铅离子的迁移速率的判断提供了简便方法。