本发明涉及肿瘤疫苗及其制备方法和用途，属于医药领域。本发明提供了肿瘤疫苗，它是将乳酸刺激的肿瘤细胞灭活制备得到的。本发明还提供了所述肿瘤疫苗的制备方法和用途。小鼠移植瘤模型实验证明，本发明采用乳酸刺激肿瘤细胞得到的疫苗在预防性及治疗性实验中均显示出显著的抗肿瘤作用，能够抑制肿瘤的生长，延长实验小鼠的生存时间，提高生存率，且效果明显优于未经乳酸刺激的灭活肿瘤细胞。本发明为临床防治肿瘤提供了新的用药选择，也提供了新的肿瘤治疗策略。