本发明涉及尿道口定位装置领域，具体涉及一种女性尿道口定位装置及其定位方法、使用方法，该定位装置包括一个底盘，所述底盘有用于放置阴蒂处的上顶点、置于小阴唇内侧的左右顶点，还设有能容纳尿道口大小的定位孔，且与尿道口对应；还包括附在底盘上的辅助定位件，设在所述定位孔的外侧，用来夹持本装置进行定位。使用时，一只手持辅助定位件，将所述底盘置于阴道前庭，上顶点放置于阴蒂处，左右顶点置于小阴唇，患者调整至舒适体位，另一只手持导尿管穿过辅助定位件、通过底盘上的定位孔插入尿道口。本发明根据女性尿道口解剖位置进行设计，可实现遮挡阴道口，辅助定位尿道口，缩小患者寻找尿道口的范围，提高一次性导尿的成功率。