本发明公开了一种双醛多糖纳米颗粒交联胶原水凝胶及其制备方法。首先将多糖进行胆固醇基团疏水改性，然后利用高碘酸钠特异性地将多糖氧化以制备具有双醛结构的两亲性多糖衍生物，之后将其于水溶液中自组装形成具有核壳结构的双醛多糖纳米颗粒；接着将质量分数为3％～6％的双醛多糖纳米颗粒溶液和0.4％～0.9％胶原溶液按体积比为1:(0.5～1.5)混合搅拌均匀，于30～37℃放置24h制备得到双醛多糖纳米颗粒交联胶原水凝胶。本发明的优点是：以绿色无害的双醛多糖纳米颗粒作为交联剂，制备的水凝胶孔径均一，机械性能良好，生物相容性好，其在组织工程支架材料领域具有良好的应用前景。