SRY特异性TaqMan探针引物对，由第一引物对、第一探针、第二引物对和第二探针组成；所述第一引物对由正向引物和反向引物组成，第一引物对中的正向引物的核苷酸序列为序列表中SEQ ID NO：1所示，第一引物对中的反向引物的核苷酸序列为序列表中SEQ ID NO：2所示，第一探针的核苷酸序列为序列表中SEQ ID NO：3所示；所述第二引物对由正向引物和反向引物组成，第二引物对中的正向引物的核苷酸序列为序列表中SEQ ID NO：4所示，第二引物对中的反向引物的核苷酸序列为序列表中SEQ ID NO：5所示，第二探针的核苷酸序列为序列表中SEQ ID NO：6所示。一种实时荧光SRY基因检测试剂盒，包括样品处理液、PCR反应液I和PCR反应液II。