本发明提供了一种表面电荷可转换的聚合物纳米药物载体及制备方法和应用，该表面电荷可转换的聚合物纳米药物载体为两嵌段聚合物，包括聚氨基酸嵌段和聚磷酸胆碱嵌段；其中聚氨基酸嵌段由聚赖氨酸或聚鸟氨酸接枝对羧基苯甲醛和抗癌药物制成。接枝了对羧基苯甲醛和抗癌药物的聚氨基酸作为纳米胶束的疏水性内核，亲水段为聚磷酸胆碱，为纳米载体提供了优异的生物相容性；同时对羧基苯甲醛与聚氨基酸的氨基反应形成席夫碱，封闭了氨基的正电荷；当载体处于微酸环境时，如肿瘤组织细胞外基质，席夫碱会快速断裂使氨基裸露，实现载体电荷从负电荷到正电荷的快速转变，促进癌细胞对载体的内吞。