本发明属于口腔再生医学技术领域，尤其涉及一种用于3D生物打印的牙周生物模块及构建方法及应用，所述模块设有网格结构、柱状结构和生物墨水，网格结构由N个小格交织形成，小格为中空；柱状结构设有M个柱状体和底板，柱状体并列固定于底板上与底板形成一体；柱状体在底板上位置与网状结构中小格位置相对应，网状结构与柱状结构嵌合成一体；小格内壁与柱状体外壁之间设有孔隙，小格直径>柱状体直径。本发明将活性生物墨水光固化成型，构建的牙周生物模块在为细胞提供良好的粘附与生长微环境的同时，使细胞在空间和结构上具有特殊且特定的排列顺序，且可维持长期微观结构的稳定，并能在实验动物体内良好地修复牙周缺损。