本发明属于荧光材料制备领域，具体涉及一种荧光棉花纤维的原位制备方法。具体方法为：（1）常温下将烷基吡啶盐溶于水溶液中，得到透明澄清的前驱体溶液；（2）将一定质量的棉花浸入到上述溶液中，待棉花完全浸湿后加入一定浓度的强碱溶液；（3）缓慢搅拌一段时间，将棉花从溶液中取出，并离心去除棉花中的水溶液；（4）用清水清洗棉花纤维至中性，并去除残留未反应的烷基吡啶盐，干燥后即可得到具有均匀绿色荧光的棉花纤维。本发明的制备方法简单，生产成本低廉，制得的荧光棉花纤维稳定，且不改变棉花的强度，在纺织领域具有潜在的应用价值。